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大鼠白介素12(IL-12P70)ELISA試劑盒實驗原理
發(fā)布時間:2025/9/12瀏覽:62次
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  大鼠白介素12(IL-12P70)ELISA試劑盒的實驗原理基于?雙抗體夾心法?,通過特異性抗體捕獲目標蛋白并放大信號,最終實現(xiàn)定量檢測。以下是詳細解析:

  1. ?核心原理?

  雙抗體夾心?:試劑盒采用兩種高親和力抗體,分別針對IL-12P70的不同表位。

  包被抗體?:預(yù)包被在酶標板上的抗大鼠IL-12單抗,捕獲樣本中的IL-12P70?。

  檢測抗體?:生物素標記的抗IL-12抗體,與已結(jié)合的IL-12P70形成“夾心"復(fù)合物?。

  信號放大?:通過辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)與生物素結(jié)合,催化底物顯色(TMB),顯色強度與IL-12P70濃度成正比?。

  2. ?實驗流程?

  樣本孵育?:標準品或待測樣本與包被抗體反應(yīng),特異性結(jié)合IL-12P70?。

  洗滌?:去除未結(jié)合物質(zhì),減少背景干擾?。

  檢測抗體孵育?:生物素化抗體與IL-12P70結(jié)合,形成復(fù)合物?。

  酶標記物反應(yīng)?:HRP-鏈霉親和素與生物素結(jié)合,催化TMB顯色?。

  終止與檢測?:加入終止液后,在450nm波長測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算濃度?。

  3. ?技術(shù)特點?

  高特異性?:抗體僅識別IL-12P70(p35/p40異源二聚體),避免與其他亞型(如p40同源二聚體)交叉反應(yīng)?。

  靈敏度?:檢測限通常為0.156-10ng/mL,適用于低濃度樣本?。

  樣本兼容性?:支持血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等樣本類型?。

  4. ?應(yīng)用場景?

  免疫研究?:評估Th1/Th2細胞平衡及IFN-γ分泌水平?。

  疾病模型?:如哮喘、腫瘤微環(huán)境中的IL-12動態(tài)監(jiān)測?。

  注意事項

  樣本處理?:避免反復(fù)凍融,尿液樣本需離心去除顆粒物?。

  干擾因素?:NaN3會抑制HRP活性,需避免使用含防腐劑的樣本?。

  注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

  大鼠白介素12(IL-12P70)ELISA試劑盒 本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。

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